共創(chuàng)共贏
二甲基黃和二乙基黃，屬于工業(yè)染劑，主要用于石蠟、塑膠、印刷油墨、石油和肥皂等的著色，具有致癌性。因其不屬于食品添加劑范疇，從未列入中國臺灣監(jiān)控部門的常規(guī)檢查項目，被當地不法商人利用至今。目前，關于該類物質的測定方法幾乎沒有報道。
迪馬科技建立固相萃取-超液相色譜串聯質譜法同時檢測腐乳中二甲基黃和二乙基黃，本方案具有
以乙腈為提取液，采用ProElut DYC固相萃取柱凈化樣品，通過UPLC- MS/MS檢測；
前處理步驟簡單、凈化效果好、回收率高、基質效應小優(yōu)點；
保證實驗結果準確性、重現性。方法檢出限0.03 μg/kg，定量限為0.1 μg/kg；
適用于各省市出入境、質檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構、食品檢測機構等。
ProElut DMY 柱由2種吸附劑按照一定的比例分層填裝而成，采用不同作用機理去除雜質，同時對二甲基黃和二乙基黃沒有不可逆吸附，保證了樣品的凈化效果及回收率；本產品是商品化的成品柱，不用手工填裝，吸附劑穩(wěn)定性好，不受外界環(huán)境因素影響，保證實驗結果的重現性和準確性；過柱過程操作步驟簡單，節(jié)省時間，提高了工作效率
以下為詳細解決方案，敬請參考！
腐乳中二甲基黃和二乙基黃的測定
1、適用范圍
適用于腐乳中二甲基黃和二乙基黃的檢測，二甲基黃的方法檢出限是0.03 µg/kg，二乙基黃的方法檢出限是0.04 µg/kg，定量限是0.1 µg/kg。
2、提取
取1.0 g樣品，加1.0 g氯化鈉與5 mL乙腈，渦旋混勻，6000 rpm下離心2 min，精密量取2.5 mL上清液待凈化。
3、凈化——ProElut DMY 3 mL（Cat#：65914）
a活 化： | 3 mL乙腈活化； |
b上 樣： c淋 洗： | 加入待凈化液，棄去流出液； 加入3 mL乙腈，棄去流出液； |
d洗 脫： | 加入4 mL10%氨水甲醇，收集流出液； |
d重新溶解： | 將流出液在50 ℃下氮吹至干，用乙腈定容至1 mL，過0.22 µm微孔濾膜，供LC-MS分析。 |
4、分析條件
4.1 UPLC 條件：
色譜柱：Endeavorsil C18，100 × 2.1 mm，1.8 μm (Cat.# 87003)
流 速：0.2 mL/min
進樣量：5 μL
柱 溫：35 ℃
流動相： A：0.1%甲酸水 B：乙腈
梯度設置
時間/Min. | 0 | 5 | 5.5 | 10 |
A（%） | 20 | 10 | 20 | 20 |
B（%） | 80 | 90 | 80 | 80 |
4.2 質譜條件：
電離模式：ESI | 掃描方式：正離子掃描 |
檢測方式：多反應監(jiān)測 | 電噴霧電壓：5500 V |
霧化氣壓力：50 psi | 輔助氣壓力：50 psi |
氣簾氣壓力：20 psi | 離子源溫度：500 ℃ |
定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表
藥物名稱 | 定性離子對 | 定量離子對 | 碰撞氣能量/eV | 去簇電壓/ V |
（m/z） | （m/z） | |||
(母離子/子離子) | (母離子/子離子) | |||
二甲基黃 | 226.2/77.0 | 226.2/77.0 | 28 | 77 |
226.2/134.1 | 28 | |||
二乙基黃 | 254.2/120.2 | 254.2/120.2 | 34 | 73 |
254.2/148.1 | 26 | |||
254.2/134.1 | 33 |
5、添加回收結果
腐乳中二甲基黃和二乙基黃的LC-MS檢測添加回收結果
分析物 | 基質 | 添加水平(µg/kg) | 回收率(%) |
二甲基黃 | 黃色腐乳 | 1.0 | 95.4 |
二乙基黃 | 1.0 | 98.6 | |
二甲基黃 | 紅色腐乳 | 1.0 | 90.5 |
二乙基黃 | 1.0 | 92.3 |
二甲基黃標準多反應監(jiān)測色譜圖
二乙基黃標準多反應監(jiān)測色譜圖
添加水平為1.0 µg/kg黃色腐乳中二甲基黃和二乙基黃檢測的多反應監(jiān)測色譜圖
黃色腐乳中二甲基黃二二乙基黃檢測(空白樣品)的多反應監(jiān)測色譜圖
添加水平為1.0 µg/kg紅色腐乳中二甲基黃和二乙基黃檢測的多反應監(jiān)測色譜圖
紅色腐乳中二甲基黃二二乙基黃檢測(空白樣品)的多反應監(jiān)測色譜圖
腐乳中二甲基黃和二乙基黃的測定相關產品信息：
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
65914 | 用于腐乳中二甲基黃、二乙基黃檢測 ProElut DMY | 3 mL, 50/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 | ||
12-N-12774-100MG | 二甲基黃[60-11-7] | 100 mg |
50P-C12604600 | 二乙基黃[2481-94-9] | 100 mg |
色譜柱及保護柱 | ||
87003 | 超液相色譜柱 Endeavosil C18 | 100 × 2.1 mm，1.8 μm |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50102 | 甲醇 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
通用色譜產品 | ||
52401B | 瓶架/藍色（現貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*
